分析您的試驗應用的類型
一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過適用于何種分析類型,如:可以應用于WB IHC ICC ELASA分析等,如果抗體說明書沒有提及的應用類型。
并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型,而僅是說明尚未經過此種分析試驗驗證,如果抗體不適用某些分析試驗,則會在抗體說明書上標注出來不適于某分析試驗。
樣本的物種
應選擇物種相同或有交叉反應的抗體,抗體可能與不同物種的同種靶蛋白有交叉反應,因其氨基酸序列同源性較高,如果樣本的種類未列入抗體說明書上的交叉反應種屬表中。
并不意味著該抗體不適用于檢測該物種的蛋白,而只是表示該物種尚未用此抗體檢測驗證過,應通過序列比對的方法來預測交叉反應,可應用Expasy 和 NCBI BLAST來進行不同物種蛋白同源性比對。
雙重染色抗體的選擇
用未偶聯一抗進行細胞培養物或組織切片的雙重免疫染色要求一抗來源于不同物種并且二抗分別識別其中之一,二抗說明書應描述其與其它物種來源的免疫球蛋有否有交叉吸附。